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本公眾號(hào)曾提到過(guò)目前越來(lái)越多的醫(yī)療機(jī)構(gòu)是用雪貂來(lái)做動(dòng)物模型,以及使用其做醫(yī)學(xué)研究的意義。那具體在進(jìn)行試驗(yàn)的時(shí)候,到底應(yīng)該如何進(jìn)行操作呢?本文將就此做一個(gè)簡(jiǎn)單的介紹。
保 定
保定一般分為人工保定、器械保定和化學(xué)保定。
人工保定是最常用的保定方式,這種保定方式下可進(jìn)行動(dòng)物體檢、觀察、給藥等操作??紤]到雪貂的行為習(xí)性,強(qiáng)烈建議要做好防抓咬措施,比如佩戴防抓咬手套。手套需既能保護(hù)操作人員的安全,又兼具靈活性可以安全地操作動(dòng)物。抓取時(shí),可以一只手的手掌貼著動(dòng)物肋骨從前肢后方將它”舀“起(圖1),另一只手輕柔地抓住其頭肩部背側(cè)的松軟皮毛,待抓實(shí)后,托住肋骨的手就可以轉(zhuǎn)而來(lái)?yè)巫?dòng)物的后肢,使得其呈直立的狀態(tài)。抓取得當(dāng)?shù)脑?,?dòng)物會(huì)表現(xiàn)得溫順和放松,伴隨“打哈欠”的反應(yīng)(圖2)。抓取時(shí)需要注意的是,一定要托住動(dòng)物的下肢(遠(yuǎn)端),避免動(dòng)物身體搖晃,由于重力作用壓迫到氣管造成氣道阻塞。
當(dāng)需要保定稍長(zhǎng)時(shí)間時(shí),則優(yōu)先考慮器械保定,器械保定的方式多種多樣,簡(jiǎn)單的甚至用毛巾將雪貂包裹起來(lái),前肢緊貼身體,露出頭部即可。復(fù)雜一點(diǎn)的,就可以使用圓管或錐體管,將動(dòng)物更牢固地保定住。圖3就是一個(gè)圓管,通過(guò)利用雪貂“愛(ài)鉆洞”的特性,可以輕松使其鉆入其中,再將后面用蓋子固定防止它退出。管道建議使用透明材質(zhì),這樣方便觀察動(dòng)物在里面時(shí)的呼吸情況和行為,同時(shí)保定器械的細(xì)節(jié)設(shè)計(jì)還應(yīng)確保動(dòng)物能自由呼吸和充分散熱。從福利角度來(lái)說(shuō),動(dòng)物在保定器械中的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(通常不超過(guò)30-45分鐘),且建議通過(guò)逐漸增加在保定圓管中的時(shí)間,讓動(dòng)物逐漸適應(yīng)該保定裝置。
化學(xué)保定,則是因?yàn)橐恍┨厥獠僮餍枰耆潭ㄗ?dòng)物如鼻內(nèi)和氣管內(nèi)給藥以及顱內(nèi)腔靜脈血液采集。注射麻醉劑需要的恢復(fù)時(shí)間較長(zhǎng)(30-60分鐘),而吸入麻醉是快速可逆的,動(dòng)物可在3-5分鐘內(nèi)恢復(fù)。典型的藥物包括注射麻醉劑,如氯胺酮、氯胺酮/塞拉嗪混合物、替來(lái)他明加唑拉西泮,以及吸入麻醉劑,如異氟烷。動(dòng)物麻醉后,需要監(jiān)護(hù)其呼吸情況和體溫,因?yàn)槁樽韯┤菀讓?dǎo)致動(dòng)物一過(guò)性的體溫降低。據(jù)報(bào)道,異氟烷麻醉會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物一過(guò)性的(45分鐘左右可恢復(fù))血細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)、血紅蛋白濃度降低,主要是由于脾臟內(nèi)的紅細(xì)胞被暫時(shí)“封存”導(dǎo)致。因此如果使用異氟烷麻醉時(shí),采集的臨床病理血樣應(yīng)格外注意這點(diǎn)。
給 藥
和其他常規(guī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物類(lèi)似,雪貂主要的給藥方式有口服,皮下注射、肌肉注射、靜脈注射和腹腔注射。每公斤雪貂的推薦給藥容積和針頭大小如表1。
表1:雪貂的推薦給藥容積和針頭大小a
a. 本表借鑒自Cornell University Center for Animal Resources and Education
b. ≤21G 針頭
c. ≤23G 針頭
雪貂的皮下注射、肌肉注射和腹腔注射的操作流程方法和常規(guī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的操作類(lèi)似,皮下注射多選取頸背部皮膚,肌肉注射多選取后肢肌肉,腹腔注射選取腹部的右下區(qū)域,靜脈注射常選取頭靜脈、頸靜脈或者腔靜脈。
口服給藥:
如果給予的口服藥物比較美味,雪貂會(huì)自主將注射器內(nèi)的藥物喝下,成年雪貂每分鐘可以自主飲下10毫升的液體,單次可服下最多100毫升。
經(jīng)口灌胃給藥:
適用于需要精準(zhǔn)劑量的給藥,或是雪貂不愿自主采食時(shí)。灌胃前需要先測(cè)量灌胃管的長(zhǎng)度并進(jìn)行標(biāo)記(給藥管一般不粗于5mm), 長(zhǎng)度則是從嘴到最后一根肋骨下大約1英寸的位置。位置確定后,一人保定住雪貂,另一人進(jìn)行給藥操作,如圖4所示,先用開(kāi)口器(bite block)將雪貂嘴巴打開(kāi),將灌胃管輕柔快速的插入食道至標(biāo)記位置,需要的話可以用潤(rùn)滑劑潤(rùn)滑灌胃管。通過(guò)將灌胃管的另一頭插入盛有水的水杯中,來(lái)確定灌胃管插入位置是否正確。如正確,水不會(huì)冒泡,如不正確,則水會(huì)冒泡或者被吸入管內(nèi)(圖5)。位置確認(rèn)正確后,即可把注射器連在灌胃管上進(jìn)行給藥。通常給藥量5-15毫升,單次給藥量絕不能超過(guò)50毫升。
良好的保定和給藥操作技術(shù),既能保證動(dòng)物的舒適安全,人員的安全,進(jìn)而能夠確保試驗(yàn)的順利進(jìn)行。同時(shí)在試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí),應(yīng)關(guān)注給藥容積的最大限定量,保證動(dòng)物的福利。
來(lái)源:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物那些事兒公眾號(hào)
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